超高回收率的酶聯(lián)免疫試劑盒上海恒遠(yuǎn)提供：
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酶聯(lián)免疫原理：
 1. 使抗原結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性；
 2. 使抗原與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原，而且此酶標(biāo)抗原既保留其免疫活性，又保留其酶活性；
 3. 測(cè)定時(shí)將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng)，再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例；
 4. 再加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物，根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析，以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。
    ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常可見到一些錯(cuò)誤結(jié)果。
    
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ELISA的類型(雙抗體夾心法)：
 1. 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
 2. 加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
 3. 加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
 4. 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。
   在臨床檢修中，此法合用于檢修各種蛋白質(zhì)等大分子抗原。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)，作一步法檢測(cè)。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。
        
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阻斷ELISA：
    本法主要用于檢測(cè)型特異性抗體。該方法現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)、豬偽狂犬病(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測(cè)方法。
下面以AP2型抗體的阻斷ELISA檢測(cè)法為例介紹其操作程序：
① 100μl AP2型工作量抗原包被→4℃放置一個(gè)晚上，洗滌三次、拋干
② 用200μl阻斷緩沖液進(jìn)行封閉→37℃60分鐘，洗滌三次、拋干
③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl→37℃60分鐘，洗滌三次、拋干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清→37℃30分鐘，洗滌三次、拋干
⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP→37℃60分鐘，洗滌三次、拋干
⑥ 加100μl OPD底物液→37℃20分鐘，加終止液
⑦ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。
    本試驗(yàn)同時(shí)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)陰、陽性血清對(duì)照、兔抗AP2型陽性對(duì)照、空白對(duì)照。