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Occludin,人緊密連接蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒原理

Occludin,人緊密連接蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒原理

簡要描述:Occludin,人緊密連接蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人緊密連接蛋白(Occludin)的含量。

產(chǎn)品型號:

所屬分類:人酶聯(lián)免疫試劑盒

更新時間:2022-08-27

詳細說明:

Occludin,人緊密連接蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒原理

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人緊密連接蛋白(Occludin)的含量。

l 有效期:6個月

l 保存條件:2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人緊密連接蛋白(Occludin)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人緊密連接蛋白(Occludin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

Occludin,人緊密連接蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒原理操作流程(具體請參照說明書)

① 加抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干

② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液

⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值

常見問題

實驗中zui可能出現(xiàn)問題       

一、所有孔未顯色?

分析原因:      

1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。          

2、用錯試劑。          

3、在操作中忘記加酶或抗體。     

 解決辦法:            

1、檢查洗板器械,比如洗板機管道是否堵塞、洗液是否用完。          

2、在加樣前,要看清瓶簽。          

3、嚴(yán)格按說明書操作步驟進行實驗,確保每步都到位。          

二、所有孔顯色偏低?

分析原因:    

1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。          

2、洗板不干凈。          

3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。          

4、溫度沒達到要求。          

5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。      

解決辦法:     

1、手工加蒸餾水洗板時,要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。    

2、洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。      

3、嚴(yán)格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。      

4、控制孵育溫度在25℃。       

5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。

儲存方式

試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,有效期六個月,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,提供批次試劑盒



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