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K-Ras4,人K-Ras4酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

K-Ras4,人K-Ras4酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

簡要描述:K-Ras4,人K-Ras4酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人K-Ras4(K-Ras4)的含量。

產(chǎn)品型號:

所屬分類:人酶聯(lián)免疫試劑盒

更新時間:2022-08-29

詳細(xì)說明:

K-Ras4,人K-Ras4酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人K-Ras4(K-Ras4)的含量。

l 有效期:6個月

l 保存條件:2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人K-Ras4(K-Ras4)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人K-Ras4(K-Ras4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

K-Ras4,人K-Ras4酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)的類型
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。

反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。

間接法測抗體

間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法(見圖2-3)。操作步驟如下:
1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2)加稀釋的受檢血清,保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3)加酶標(biāo)抗抗體。可用酶標(biāo)抗人Ig以檢測總抗體,但一般多用酶標(biāo)抗人IgG檢測IgG抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合,從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量正相關(guān)。
4)加底物顯色
本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷。間接法的優(yōu)點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法。
間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結(jié)果,但應(yīng)盡可能予以純化,以提高試驗的特異性。特別應(yīng)注意除去能與一般健康人血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì),例如以E.Coli為工程酶的重組抗原,如其中含有E.Coli成份,很可能與受過E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發(fā)生反應(yīng)。抗原中也不能含有與酶標(biāo)抗人Ig反應(yīng)的物質(zhì),例如來自人血漿或人體組織的抗原,如不將其中的Ig去除,試驗中也發(fā)生假陽性反
應(yīng)。另外如抗原中含有無關(guān)蛋白,也會因竟?fàn)幬蕉绊懓恍Ч?br />間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性。病人血清中受檢的特異性IgG只占總IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強(qiáng),非特異IgG可直接吸附到固相載體上,有時也可吸附到包被抗原的表面。因此在間接法中,抗原包被后一般用無關(guān)蛋白質(zhì)(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封閉(blocking)固相上的空余間隙。另外,在檢測過程中標(biāo)本須先行稀釋(1:40~1:200),以避免過高的陰性本底影響結(jié)果的判斷。

代檢測服務(wù)

購買本公司目錄任何一種檢測試劑盒,都可提供代檢測服務(wù),您只需將需要檢測的動物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Mon key, Pig……)種類和檢測指標(biāo)(介素類、因子類)及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T)通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起,現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中!

寄標(biāo)本時需注明以下情況:

標(biāo)本編號;2、所測項目;3、是否做復(fù)孔;3、;4、實驗后標(biāo)本是否寄回。

種類

大象、牛、大鼠、小鼠、人、馬、兔、大熊貓、類人猿、蜥蜴、蝌蚪、菠菜、羊、犬、魷魚、蝸牛、扁豆、豌豆、馬鈴薯、蟈蟈、豚鼠、倉鼠、金黃地鼠、鵝、鴿子、禿鷲、河馬、犀牛、野豬、東北虎、斑鳩、蚯蚓、鯉魚、眼鏡蛇、青蛙、丹頂鶴、鳥類等動植物種屬

 



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